Daniel Jason Sudeikis est le fils de Kathryn Wendt, ancienne présidente de l'American Society of Travel Agents et de Dan Sudeikis, Vice-président de la même agence. Son oncle, George Wendt est acteur (c'est le héros de la série Cheers). Ayant grandi dans le Kansas, il gardera une appartenance forte à cet Etat et reste un ardent supporter des Kansas Jayhawks, l'équipe de base Ball de l'université du Kansas. Très tôt attiré par le théâtre et l'improvisation il commence avec le groupe ComedySportz, troupe comique de Kansas City puis co-fonde à Las Vegas la troupe The Second City. C'est là qu'il est repéré par Jeff Richmond alors époux d'une scénariste et comédienne du Saturday Night Live, Tina Fey. Ceux-ci lui permettent d'accéder en 2003 à la troupe de la célèbre émission. Commençant en tant qu'auteur, il passe sur le devant de la scène dès 2005 et s'y fait alors remarquer pour ses nombreuses imitations de personnalités (parmi lesquelles Bill Paxton, Joaquin Phoenix, Philip Seymour Hoffman ou Zack Snyder).
Son amitié avec Tina Fey lui permet de participer en 2007 à la série dont elle est la star, 30 Rock. Il y incarne Floyd, un soupirant de Liz Lemon, le personnage de Tina Fey. Parallèlement, il donne de la voix pour le jeu Grand Theft Auto IV dans lequel il est un animateur radio et fait ses premiers pas au cinéma. Ainsi, il participe en 2007 à la comédie chorale The Ten autour des Dix Commandements avec Paul Rudd (qui a étudié dans la même école que lui), Jon Hamm (qu'il a déjà croisé sur 30 Rock) et Winona Ryder. Il multiplie ensuite les seconds rôles dans des comédies populaires comme Jackpot, Semi-Pro ou encore Trop loin pour toi. Il lui faut attendre 2011 pour obtenir enfin un premier rôle grâce aux frères Farrelly qui font appel à lui pour Bon à Tirer : il partage l'affiche avec Owen Wilson, les deux comiques incarnant deux maris frustrés à qui leurs femmes donnent une autorisation d'une semaine pour aller voir ailleurs.
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